梅里埃腸桿菌科和革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒（API 10 S）說明書

腸桿菌科和其它非苛養革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒（比色法）

說明書

【產品名稱】

通用名稱：腸桿菌科和其它非苛養革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒（比色法）

英文名稱：API 10 S

【包裝規格】

50 測試/盒

【預期用途】

用于來源于人體并經過分離培養的腸桿菌科和其它非苛養革蘭氏陰性桿菌的鑒定。

該產品用于可導致腹瀉、血流感染、尿路感染等的腸桿菌科和其它非苛養革蘭氏陰性桿菌的鑒定，臨床常見

樣本來源有糞便、直腸拭子、尿、血等。

【檢驗原理】

API 10 S 試驗條由 10 個含有干燥底物的微量小管組成。這些測定是用菌懸液接種和復溶培養基。孵育過程

中，所產生的最終代謝產物通過自然反應或加入附加試劑而變色。鑒定結果可根據說明書的判讀表進行讀出，

也可參照生化譜檢索手冊或鑒定軟件，得到鑒定結果。

【主要組成成分】

試劑盒組成(用于 50 個測試)

- 50 個 API 10 S 試條

- 50 個孵育盒

- 50 張結果報告單

- 1 個 封口夾

試劑條成分

API 10 S 試條的成分請參閱說明書后的結果判讀表。

需要但沒有提供的試劑和設備

試劑/儀器

- API NaCl 0.85 % 培養基 5 mL（產品號. 20 230）或 API 菌懸液培養基, 5 mL（產品號. 20 150）

- 試劑：TDA （產品號. 70 402）

- JAMES （產品號. 70 542）

- NIT 1 + NIT 2 （產品號. 70 442）

- 氧化酶 （產品號. 55 635*）

* 某些國家不銷售，請用相同功能試劑代替

- 礦物油 （產品號. 70 100）

材料

- 吸管或 PSI 管

- 安瓿保護套

- 安瓿架

- 微生物實驗室常規設備

【儲存條件及有效期】

2～8℃保存，有效期為 18 個月。

API 10 S 試條包裝于含干燥劑的密封鋁箔袋中。一旦打開（*），未用完試條用密封夾（包含在試劑盒中）將包裝袋重新密封，2～8℃可保存 10 個月有效（或至包裝盒上的有效期）。

（*）建議開封方法：在封口下方剪開鋁箔裝，為防止意外損壞干燥劑，開封時應保持鋁箔袋垂直。

生產日期：詳見外包盒標簽。

有效期至：詳見外包盒標簽。

【適用儀器】

- apiweb TM 鑒定軟件（產品號 40 011）

- 微生物實驗室常規設備。

【樣本要求】

API 10 S 不能直接用于臨床或其他標本（如如血樣、尿樣和糞樣、直腸拭子等等）。被鑒定的微生物必須首先根據標準的微生物技術在適當的培養基上進行分離。

【檢驗方法】

氧化酶試驗

? 嚴格按生產商使用說明做氧化酶試驗并將結果記錄在結果報告單上（第 11 個鑒定試驗）。

試條的準備

• 準備一個培養盒（盤和蓋子），倒入約 5mL 蒸餾水或軟化水【或其它不含任何添加劑或能產生揮發性氣體的化學物質的水（如 Cl2, CO2,等）】于盤的蜂窩小凹中，造成一個濕室。

• 在盤的長邊寫上菌株編號（不要寫在蓋子上，因為操作過程中很容易將蓋子放到其它試條上）。

• 從包裝袋中取出試條。

• 將試條放入培養盒中。

注：API 10 S 只適用于腸桿菌科和/或非苛養 G－桿菌鑒定。對營養有特殊要求并需必要防護措施的苛養菌（布魯氏菌 Brucella 和弗朗西絲菌 Francisella）不包括在 API 10 S 數據庫中，需用其他方法鑒定。

接種物的制備

• 按照產品說明書中“警告和注意"的相關部分，打開一個 API NaCl 0.85%培養基安瓿（5mL）或一個 API 懸浮培養基（5mL），或用不含任何添加劑的無菌生理鹽水或滅菌蒸餾水（5mL）。

• 用吸管或 PSI 管，從分離平板上取單個菌落。推薦使用 18~24 小時培養物。

• 仔細乳化成均勻的細菌懸液。

菌懸液制備好后須立即使用。

注 : 大多數弧菌屬嗜鹽菌。如懷疑為弧菌，則應用 API NaCl 0.85%培養基制備菌懸液。

試條的接種

• 用同一只吸管，將菌懸液加入試條的管中（為避免在管底形成氣泡，將試條輕微向前傾斜并把吸管或 PSI管緊靠小杯邊緣以避免在管部形成氣泡）。

• CITE 試驗，充滿管和杯。

• 其他試驗菌液只加入管（不加入杯）。

• 在試驗 LDC, ODC, H2S 和 URE 小杯內加入礦物油形成新月形凸起以保證厭氧環境。

• 蓋好培養盒蓋。

于 36°C ± 2°C 孵育 18～24 小時。

試條的判讀

• 孵育后，根據結果判讀表判讀所有反應。

• 記錄全部結果于結果報告單上。

• 需加附加試劑的試驗：

- TDA 試驗：加一滴 TDA 試劑。顯示紅褐色為陽性反應。

- IND 測試：加一滴 JAMES 試劑。整個杯顯粉紅色為陽性反應。

- NO2試驗: 在 GLU 試驗中各加入一滴 NIT 1 和 NIT 2 試劑，等待 2 到 5 分鐘。紅色為陽性反應。

注：硝酸鹽還原試驗和吲哚試驗必須最后做，以免這些反應釋放的氣體干擾其他試驗的結果判斷。加完附加試劑后注意不要再蓋蓋子。

解釋

鑒定結果根據數值編碼獲得。

• 數值編碼的確定：

在結果報告單，每 3 個試驗為一組，每組的陽性反應分別賦予 1、2 或 4 的數值，將每組數值相加得到一個 4位數字的編碼。

• 鑒定：

鑒定結果是根據數據庫 (V3.1)得到。

* 依據數值編碼：

-從檢索手冊中查找數值編碼。

* 依據 apiwebTM 鑒定軟件：

-在鍵盤上輸入 4 位數字的數值編碼