梅里埃酵母菌鑒定卡相關藥敏試驗方法介紹

　　梅里埃酵母菌鑒定卡在實驗室中很常見，酵母菌作為一類重要的真菌，被廣泛應用于人類的生產活動中。微基生物專注微生物多樣性研究，為高校、醫院、研究所等單位提供科研服務。不僅可以檢測土壤、水體、糞便、腸道內容物等樣本中混合微生物的種類及豐度，而且還可以提供細菌、真菌等純菌的菌種鑒定服務。

 

　　梅里埃酵母菌鑒定卡菌種鑒定一般是提取純菌A的基因組DNA，然后PCR擴增16srDNA片段，之后通過一代測序或三代測序檢測16SrDNA的全長，與國際上的數據庫進行比對，默認選取比對結果中相似性高的物種分類信息，之后構建系統發育樹，然后得出樣本A與XX物種的相似性高。

 

　　操作規程：

 

　　1、取血平板上的單個菌落制片，做革蘭氏染色鏡檢證實為真菌。

 

　　2、從冰箱取出鑒定卡（YBC），待恢復至室溫后取出編號，放到卡片架上。

 

　　3、濁度計校零及100％，用裝有結晶紫的試管調零，用0.45％的鹽水管調100％。

 

　　4、挑取經純化的單個菌落，用濃度為0.45％鹽水，配制成2麥氏單位濃度的菌懸液。

 

　　5、放入填充箱內填充，待填充完成后用塞子封口，檢查和排除氣。

 

　　6、把卡片放在30℃的孵箱內孵育18～24小時，然后放入閱讀箱內，儀器自動讀卡。

 

　　7、同時做手工藥敏試驗：有2種方法：

 

　　8、配制0.5麥氏單位濁度該菌液，用棉簽均勻涂于念珠菌藥敏平板上，待5min后貼相應藥敏紙片，35℃培養24～48小時，讀取低抑菌濃度（MIC）并報告。

 

　　9、用0.9％生理鹽水配制0.5麥氏單位濁度該菌液，再用0.9％生理鹽水1﹕1稀釋，吸取0.5ml菌懸液到念球菌藥敏平板，用棉簽均勻涂布，棄去多余的菌懸液，放置5分鐘后貼藥片，35℃培養18～24h，測量抑菌環直徑并報告。